產(chǎn)品展示PRODUCTS
細胞分離3D基質(zhì)膠套裝(不含酚紅)
更新時(shí)間:2021-10-20
訪(fǎng)問(wèn)量:1816
廠(chǎng)商性質(zhì):代理商
生產(chǎn)地址:美國
細胞分離3D基質(zhì)膠套裝(不含酚紅)產(chǎn)品說(shuō)明
1、貨號:B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10
2、規格:2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit
3、儲存條件:干冰運輸,-20℃保存,可保存一年。
一、產(chǎn)品描述
Biozellen®3D類(lèi)器官培養基質(zhì)膠套裝包含全套膠體試劑與溶解試劑,可進(jìn)行3D類(lèi)器官培養與微環(huán)境等相關(guān)實(shí)驗應用; 本試劑盒操作便利且可調控膠體硬度進(jìn)行多種類(lèi)器官培養測試;高分子膠體可快速形成水凝膠, 建議操作此培養膠體前詳讀此使用指南。
(Biozellen®3D類(lèi)器官培養基質(zhì)膠材料為植物來(lái)源,無(wú)動(dòng)物成分)
二、應用
• 3D類(lèi)器官培養。
• 適合用于3D類(lèi)器官藥物篩檢平臺
三、適用細胞種類(lèi)
• 原代細胞
• 干細胞
四、細胞分離3D基質(zhì)膠套裝(不含酚紅)試劑盒組分
B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10 | |||
貨號. | Components | Amount | Content |
B-P-00003-A | A 基質(zhì)膠 (2X) | 4、8、20 | 0.5mL / tube |
B-P-00003-C | C 緩沖溶液 (10X) | 1、2、1 | 1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT |
B-P-00003-D | D 緩沖溶液 (10X) | 1、2、1 | 1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT |
五、使用步驟:
A.試劑制備
A基質(zhì)膠:將A基質(zhì)膠溶于37℃水浴槽回溫10分鐘, 確認*融解.
C緩沖溶液(1X)制備:使用前將10X C緩沖溶液用冰的無(wú)細胞培養液(例如: 無(wú)血清DMEM、opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .
D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.
B.Biozellen®3D類(lèi)器官培養基質(zhì)膠的制備
全部步驟需要在無(wú)菌環(huán)境內操作,操作步驟如下:
1. 將24孔培養板放置于冰上預冷。
2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養基均勻混合,并與0.5毫升37℃ A膠按照 1:1 等比例均勻混合,最終細胞密度105~107cells/mL。
注:請選擇適當的培養溶液與條件進(jìn)行試驗,貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養。
3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養板上,膠體將于 5 分鐘內成膠。 注: 測試膠體是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進(jìn)行確認。
4.待膠體成膠后,添加1毫升冰的1X C緩沖溶液,并蓋過(guò)步驟3 的膠溶液,固定 15 分鐘。
5.待15分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長(cháng)之培養基溶液。
6將含有細胞的膠于37°C 二氧化碳培養箱內進(jìn)行7~14天的培養,并觀(guān)察細胞球體的形成,按正常培養基更換頻率進(jìn)行更換操作。
C、溶膠與收集細胞球體準備程序
小心的將培養基吸取移除,并用1X PBS進(jìn)行清洗。
小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的D緩沖溶液,蓋過(guò)膠滴于室溫反應 5分鐘。
溫和的用1毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。
將含有細胞球體的溶液吸入1.5 毫升離心管,用1000 rpm的轉速離心10分鐘,移除上清液體并收集細胞球體做分析。
D、收集單顆細胞準備程序
在分離單細胞前,先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進(jìn)行操作
1. 添加trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于37°C混合反應。
2. 用1毫升移液管混合,直到細胞體*分解。
3. 待細胞球體*分解,加入3倍體積的1X PBS,并用1000轉的轉速進(jìn)行離心10分鐘,并移除上清液體收集沉淀的單細胞做分析。