国产自拍AV_Biozellen 3D類(lèi)器官培養基質(zhì)膠使用方法-深圳市安培生物科技有限公司

技術(shù)文章ARTICLE

您當前的位置：首頁(yè) > 技術(shù)文章 > Biozellen 3D類(lèi)器官培養基質(zhì)膠使用方法

Biozellen 3D類(lèi)器官培養基質(zhì)膠使用方法

發(fā)布時(shí)間： 2022-02-21　　點(diǎn)擊次數： 1669次

近年來(lái)，為盡可能的模仿細胞在生物體內的生長(cháng)環(huán)境，得到更接近類(lèi)似于體內生長(cháng)的細胞, 越來(lái)越多研究人員開(kāi)始關(guān)注三維細胞、類(lèi)器官培養技術(shù)。
以下為大家介紹Biozellen 3D類(lèi)器官培養基質(zhì)膠的使用步驟：

A、試劑制備
A 基質(zhì)膠：將 A 基質(zhì)膠溶于 37℃水浴槽回溫 10 分鐘，確認*融解.
C 緩沖溶液(1X)制備：使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無(wú)細胞培養液(例如：無(wú)血清 DMEM、opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .
D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

B、Biozellen®3D 類(lèi)器官培養基質(zhì)膠的制備
全部步驟需要在無(wú)菌環(huán)境內操作，操作步驟如下：
1. 將 24 孔培養板放置于冰箱或者冰上預冷。
2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5ml 37℃ 培養基均勻混合，并與 0.5ml 37℃ A 膠按照 1:1 等比例均勻混合，最終細胞密度 1*105~1*107cells/mL。
注：請選擇適當的培養溶液與條件進(jìn)行試驗。
3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于步驟 1 預冷的培養板上，膠體將于 5 分鐘內成膠。
注: 測試膠體是否成膠，可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進(jìn)行確認。
4.待膠體成膠后，添加 1 毫升冰的 1X C 緩沖溶液，并蓋過(guò)步驟 3 的膠溶液，固定 15 分鐘。
5.待 15 分鐘固定后，小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長(cháng)之培養基溶液。
6 將含有細胞的膠于 37°C 二氧化碳培養箱內進(jìn)行 7~14 天的培養，并觀(guān)察細胞球體的形成，按正常培養基更換頻率進(jìn)行更換操作。

C、溶膠與收集細胞球體準備程序
小心的將培養基吸取移除，并用 1X PBS 進(jìn)行清洗。
小心的將 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液，蓋過(guò)膠滴于室溫反應 5 分鐘。
溫和的用 1 毫升移液管吸取，直到膠滴*溶解。
將含有細胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管，用 1000 rpm 的轉速離心 10 分鐘，移除上清液體并收集細胞球體做分析。

D、收集單顆細胞準備程序
在分離單細胞前，先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進(jìn)行操作
1. 添加 trypsin-EDTA 并與收集的細胞球體于 37°C 混合反應。
2. 用 1 毫升移液管混合，直到細胞體*分解。
3. 待細胞球體*分解，加入 3 倍體積的 1X PBS，并用 1000 轉的轉速進(jìn)行離心 10 分鐘，并移除上清液體收集沉淀的單細胞做分析。

以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉染、大規模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶(hù)，提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑；inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細胞培養規模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。

深圳市安培生物科技有限公司是美國B(niǎo)iozellen公司的中國代理商。Biozellen®3D培養基質(zhì)膠經(jīng)驗證可*替代BD/康寧的基質(zhì)膠，來(lái)源為植物源且氨基酸序列人源化，無(wú)人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服務(wù)和技術(shù)支持。

下一篇：Biozellen®3D類(lèi)器官培養基質(zhì)膠在細胞侵襲實(shí)驗的應用

上一篇：3D細胞培養的現狀及未來(lái)

產(chǎn)品中心 Products