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                                原位裂解細胞的CAT分析法

                                發(fā)布時(shí)間: 2021-12-15  點(diǎn)擊次數: 896次

                                材料與儀器

                                轉染細胞
                                Triton裂解液
                                培養皿 培養箱

                                步驟

                                1.  60 mm 培養皿中轉染了CAT表達質(zhì)粒的細胞,用2 ml PBS洗1次。每培養皿加入2 ml 低滲緩沖液,在室溫下溫育2~5 min。

                                2.  吸去低滲緩沖液,加入400 μl Triton裂解液。用橡膠刮子將細胞刮離培養血,用1 000 μl 移液器將裂解物移入1.5  ml 微量離心管中。

                                3.  微量離心1 min 除去細胞核,不可溶性蛋白。將上清轉入一個(gè)干凈的微量離心管中, 進(jìn)行CAT活性分析。

                                 


                                同實(shí)驗其他方法

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                                人生長(cháng)激素的放射免疫分析法

                                1.  取轉染了hGH表達質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物細胞的培養液100~500 μl。 2.  加100 μl 培養液或標準品至12 mm×75 mm 圓底試管中。加入100 μl 125I-

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