電穿孔法轉染如此“萬(wàn)能”，為什么還要用其他方法？

同學(xué)們在進(jìn)行轉染時(shí)，肯定被各種各樣的轉染試劑挑花了眼吧。商業(yè)化的轉染試劑通常針對多重細胞類(lèi)型、不同的核酸和各種特定的用途，也就是說(shuō)，你要從種類(lèi)繁多的試劑中挑選適合你的。

這時(shí)候，電穿孔法轉染就進(jìn)入了我們的視野。

電穿孔法轉染原理是通過(guò)脈沖電場(chǎng)，使得細胞膜上產(chǎn)生小孔，通透性被暫時(shí)的提高。周?chē)男》肿哟┻^(guò)小孔，擴散到細胞內。理論上說(shuō)，電穿孔法轉染是可以對任何細胞進(jìn)行轉染，可以轉染DNA、RNA、蛋白、糖類(lèi)等，也不需要特殊的試劑。

但為什么還是有很多實(shí)驗者選擇了脂質(zhì)體介導法等方案呢？原因如下

1、電穿孔法雖然不需要特殊試劑，但需要購買(mǎi)昂貴的電轉儀。

2、電穿孔法轉染會(huì )殺死細胞，因此需要較多的細胞和外源分子。

3、電穿孔法對實(shí)驗者的操作水平要求較高。過(guò)低的電場(chǎng)強度、過(guò)長(cháng)的電脈沖時(shí)間，會(huì )裂解細胞；電壓過(guò)低，過(guò)短的電脈沖時(shí)間則會(huì )降低轉染效率。

因此，電穿孔法不是真正的“萬(wàn)能"，實(shí)驗上也需要多學(xué)習、優(yōu)化。