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                                無(wú)血清培養基更換后細胞大量死亡的原因探究

                                發(fā)布時(shí)間: 2022-02-14  點(diǎn)擊次數: 1016次
                                   無(wú)血清培養基(SFM)是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長(cháng)時(shí)間生長(cháng)繁殖的合成培養基。但是它們可能包含個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎培養基加少量血清所配制的*培養基可以滿(mǎn)足大部分細胞培養的要求,但對有些實(shí)驗卻不適合,如觀(guān)察一種生長(cháng)因子對某種細胞的作用,這時(shí)需要排除其他生長(cháng)因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長(cháng)因子;又如需要測定某種細胞在培養過(guò)程中分泌某種物質(zhì)(抗體、生長(cháng)因子)的能力;或者要大規模的培養某種細胞,以獲得它們的分泌產(chǎn)物。因此研制出無(wú)血清培養基一直是生物科學(xué)工作者努力的目標。
                                  科研實(shí)驗使用轉染細胞在轉染前要換上無(wú)血清培養基。本來(lái)條件好好的,轉染效率也可以接受。但是過(guò)了一段時(shí)間就發(fā)生了細胞在有血清的培養基中長(cháng)的好好的,一換無(wú)血清的培養基就死亡的現象。大概4個(gè)小時(shí)就能看到較多的細胞飄起來(lái)。換了不同批次的培養基,但仍不行,這是怎么回事呢?
                                  解析:
                                  1.兩周后的培養液應補加谷氨酰胺,或者重新配液,轉染時(shí)應不含抗生素。
                                  2.確認操作方法和環(huán)境,建議檢查一下。
                                  3.脂質(zhì)體的毒性很大,如果有質(zhì)粒參與對細胞損傷更大,如果在常溫放置過(guò),對細胞更大,假期冰箱是否斷過(guò)電。
                                  4.培養箱的溫度、CO2濃度,濕度等。
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