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發(fā)布時(shí)間: 2022-01-01 點(diǎn)擊次數: 1036次免疫細胞轉染試劑是一種新開(kāi)發(fā)的試劑,用于將DNA和siRNA轉染到真核細胞系和各種原代細胞中。Zeta Life多肽小分子轉染試劑的尺寸大小是傳統脂質(zhì)體轉染試劑體積的1/10。本轉染試劑是通過(guò)細胞內?和細胞主動(dòng)吸收進(jìn)入細胞,進(jìn)入后對細胞膜無(wú)物理性損傷,不易出現細胞變形,保持高的細胞活力,不激活細胞表面或細胞體內marker,可反映真實(shí)的細胞通路蛋白原始數據,可轉染免疫細胞、懸浮細胞等。免疫細胞轉染時(shí)應使用優(yōu)質(zhì)質(zhì)粒:1.通過(guò)測量OD值來(lái)確定DNA純度和濃度,測得的OD值應介于1.7-1.9之間。脂質(zhì)體轉染基于電荷吸引原理,如果DNA不純,如帶少量的鹽離子、蛋白、代謝物污染都會(huì )顯著(zhù)影響轉染復合物的有效形成及轉染的進(jìn)行。2.含有內毒素的質(zhì)粒對細胞有很大的毒性作用。轉染時(shí),小心輕柔的將lipo2000加到培養基中并輕輕混勻,避免粗暴用力吹打,會(huì )導致脂質(zhì)體失效。免疫細胞轉染后發(fā)現轉染效率不高,可以通過(guò)兩種方法改進(jìn):1.復轉染,即轉染后12-24小時(shí)再次進(jìn)行轉染,前提是該細胞對脂質(zhì)體的耐受性較好,轉染后細胞死亡數較少。2.通過(guò)藥篩來(lái)殺死未轉入成功的細胞。前提是該質(zhì)粒帶有抗生素抗性的基因。
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