免疫細胞轉染時(shí)相關(guān)事項要了解！

 　　常規免疫細胞轉染技術(shù)可分為兩大類(lèi)：一類(lèi)是瞬時(shí)轉染，一類(lèi)是穩定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細胞中可存在多個(gè)拷貝數，產(chǎn)生高水平的表達，但通常只持續幾天，多用于啟動(dòng)子和其它調控元件的分析。一般來(lái)說(shuō)，超螺旋質(zhì)粒DNA轉染效率較高，在轉染后24-72小時(shí)內分析結果，常常用到一些報告系統如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來(lái)幫助檢測；后者也稱(chēng)穩定轉染，外源DNA既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種游離體存在。盡管線(xiàn)性DNA比超螺旋DNA轉入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小，大約1/104轉染細胞能整合，通常需要通過(guò)一些選擇性標記，如來(lái)氨丙基轉移酶（APH），潮霉素B磷酸轉移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反復篩選，得到穩定轉染的同源細胞系。