穩定載體時(shí)，為什么載體上通常有兩個(gè)抗性基因？

構建的載體上有兩個(gè)抗性基因，但一般只有一個(gè)抗性用來(lái)篩細胞。兩個(gè)抗性基因的本質(zhì)區別是什么呢？

我們來(lái)看看這個(gè)例子，現在這個(gè)是pcDNA3.1質(zhì)粒的圖譜，載體上有兩個(gè)抗性基因，Amp（氨芐青霉素）和Neo（新霉素）。

氨芐青霉素是在bla啟動(dòng)子驅動(dòng)下表達，bla是原核表達啟動(dòng)子，在大腸桿菌可以表達，因此，轉化后的質(zhì)粒用Amp可以篩選出來(lái)。

而新霉素是在SV40啟動(dòng)子驅動(dòng)下表達，SV40是真核表達啟動(dòng)子，轉入真核細胞后表達，所以只有轉進(jìn)了載體的細胞才能被篩選出來(lái)。

所以，穩定轉染時(shí)，載體上的兩個(gè)抗性基因，一個(gè)用于構建克隆時(shí)篩選細菌，另一個(gè)用來(lái)對轉染細胞的篩選。

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