銷(xiāo)售熱線(xiàn)
                              
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                                技術(shù)文章ARTICLE
                                
            
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                                馬松染色的實(shí)驗步驟和注意事項
                                
                
                                
                  發(fā)布時(shí)間： 2024-04-01　　點(diǎn)擊次數： 806次  
                
                                
                
                                
                 
                                馬松（Masson）染色是一種用于可視化組織纖維和炎性因子的染色方法。該技術(shù)充分利用了不同組織成分對陰離子燃料滲透性的差異。此法多用于觀(guān)察病變組織中纖維結締組織的增生和分布,纖維素腫瘤與肌源性腫瘤的鑒別，在肌肉疾病和心血管疾病的診斷中具有重要意義。

                                一、原理：
                                Masson染色，又成為馬松染色，是結締組織染色領(lǐng)域中經(jīng)典的一種技術(shù)方法，專(zhuān)注于膠原纖維的染色。該方法被廣泛應用于組織學(xué)研究中，其主要目的是對胞核進(jìn)行染色，并能夠有選擇地展示膠原纖維和肌纖維。

                                Masson染色的原理與陰離子染料分子的大小以及對組織的滲透性密切相關(guān)：分子的大小由其分子量決定，小分子量的染料能夠輕松穿透結構致密、滲透性低的組織，而大分子量則僅能進(jìn)入結構疏松、滲透性較高的組織。然而，由于淡綠或苯胺藍的分子量較大，因此Masson染色后，肌纖維呈現紅色，而膠原纖維呈綠色或藍色，主要用于區分這兩者。

                                圖片
                                對石蠟包埋的大鼠氣道切片進(jìn)行Masson染色
                                材料準備：4%甲醛固定液、二甲苯（AR級）、無(wú)水乙醇（AR級）、蘇木素染色液、鹽酸(AR級）、麗春紅、酸性品紅、磷鉬酸、苯胺藍、乙酸、中性樹(shù)膠

                                二、實(shí)驗步驟：
                                1、石蠟切片脫蠟至水：將切片依次置于二甲苯Ⅰ中浸泡20分鐘，二甲苯Ⅱ中浸泡20分鐘，無(wú)水乙醇Ⅰ中浸泡10分鐘，無(wú)水乙醇Ⅱ中浸泡10分鐘，95%酒精中浸泡5分鐘，90%酒精中浸泡5分鐘，80%酒精中浸泡5分鐘，70%酒精中浸泡5分鐘，最后進(jìn)行蒸餾水洗。

                                2、對細胞核進(jìn)行蘇鐵蘇木素染色：將切片浸入蘇鐵蘇木素染液中染色3-8分鐘，然后進(jìn)行流水沖洗。

                                3、利用麗春紅-酸性品紅染色：將切片置于麗春紅-酸性品紅染液中進(jìn)行染色5分鐘，然后使用0.2%冰醋酸進(jìn)行沖洗。

                                4、磷鉬酸分化：將切片放入磷鉬酸中進(jìn)行分化數秒，然后進(jìn)行水洗。

                                5、苯胺藍染色：將切片放入苯胺藍染液中進(jìn)行染色5分鐘，然后使用0.2%冰醋酸進(jìn)行沖洗。

                                6、快速脫水和透明化：按照以下步驟進(jìn)行脫水和透明化：依次將切片放入95%酒精Ⅰ中浸泡5分鐘，95%酒精Ⅱ中浸泡5分鐘，無(wú)水乙醇Ⅰ中浸泡5分鐘，無(wú)水乙醇Ⅱ中浸泡5分鐘，二甲苯Ⅰ中浸泡5分鐘，二甲苯Ⅱ中浸泡5分鐘，然后將切片從二甲苯中取出稍事晾干，最后使用中性樹(shù)膠封片。

                                7、鏡檢，并進(jìn)行圖像采集和分析。

                                三、Masson染色實(shí)驗注意事項
                                1、嚴格掌握染色步驟，特別是在每個(gè)步驟之間進(jìn)行充分洗滌是至關(guān)重要的。這有助于防止前一步驟的染料殘留對下一步染色產(chǎn)生影響。

                                2、組織的有效固定在染色過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)至關(guān)重要的作用。根據使用不同固定液的情況，可以靈活調整染色時(shí)間，以實(shí)現最佳染色效果。

                                3、使用0.2%冰醋酸水溶液進(jìn)行洗滌，有助于產(chǎn)生清晰鮮艷的色調。

                                4、注意避免過(guò)度干燥：在染色過(guò)程結束后，務(wù)必防止樣本的過(guò)度干燥，以避免產(chǎn)生偽影。

                                5、苯胺藍和麗春紅要充分溶解然后過(guò)濾使用，不過(guò)濾的染液里面雜質(zhì)過(guò)多，會(huì )阻礙染液和組織的結合緊密程度。

                                6、磷鉬酸水溶液對麗春紅和酸性復紅具有分化作用。在分化過(guò)程中，通過(guò)鏡下仔細控制，可以觀(guān)察到肌纖維和纖維素呈現紅色，而膠原纖維呈淡粉紅色即可。

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