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                                CaCl2 法制備感受態(tài)細胞

                                發(fā)布時(shí)間: 2021-12-24  點(diǎn)擊次數: 985次

                                材料與儀器

                                【 器材 】 1 .培養皿 2 .恒溫培養箱 【試劑 】 1 . LB 培養基 2 .選擇性 LB 瓊脂培養平板(含氨芐青霉素,終濃度為 50μg/ml ) 3 .氨芐青霉素 100 mg/ml 4 .宿主細菌:經(jīng) 100 mmol/L CaCl 2 處理的感受態(tài)細菌 DH5α

                                步驟

                                取 50 μL 大腸桿菌感受態(tài)細胞,加入適量質(zhì)粒(體積不得超過(guò) 4 μL )冰浴 30 min 后, 42℃ 熱激 90 s ,馬上放回冰上,冰浴 2 min ;加 400 μL LB 培養基,于 37℃ 搖床慢搖振蕩培養 45-60 min ;取 50-100 μL 涂在含有氨芐青霉素( 100 μg/mL )的 LB 固體培養基上, 37℃ 倒置培養過(guò)夜。

                                注意事項

                                嚴格按照順序加入試劑

                                以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


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