細胞培養常遇問(wèn)題集錦（十七）

細胞培養問(wèn)題集錦第十七期，小編會(huì )繼續收集相關(guān)問(wèn)題，每期都為大家更新5個(gè)細胞培養中遇到的問(wèn)題并解答~

81、

▲問(wèn)：hepg2細胞有很多小球聚集到一起，這是污染還是沒(méi)有吹開(kāi)的細胞？是不是念珠菌感染？出不來(lái)形態(tài)，吹不勻。

答：肝癌就是這樣，很容易坨，肝癌會(huì )有一個(gè)聚集成團，一片一片的clone，也會(huì )成聚集，推薦是帶丙酮酸鈉的MEM。

82、

問(wèn)：細胞培養中加入biotin有什么作用呢？

答：是為了促進(jìn)細胞增殖。

83、

▲問(wèn)：細胞轉了敲低基因的病毒之后，為什么總會(huì )出現一些比細胞還要亮的，碎片樣的東西，或者圓形的東西呢？

答：基因的表達包括 GFP用，都會(huì )用泊松分布Poisson distribution的形式出現， 有些細胞有多一點(diǎn)GFP的表達, 有些少的。圓形的細胞是因為基因蛋白表達較高 ，所以熒光蛋白表達都高。

▲問(wèn)：這種很亮的碎片呢？感覺(jué)他不像是細胞的樣子！

答：細胞開(kāi)始細胞凋亡，可能是凋亡小體，可用DAPI。

84、

問(wèn)：細胞剛復蘇都是亮亮的圓點(diǎn)是什么原因？之前復蘇長(cháng)得很快。

答：是不是還沒(méi)貼壁？

問(wèn)：之前兩天都長(cháng)滿(mǎn)貼壁了，這次也兩天了只有一點(diǎn)細胞貼壁。

答：復蘇率不高，是不是沒(méi)凍好？

問(wèn)：之前別人凍的，需要重新復蘇嗎？

答：如果培養基和血清養別的沒(méi)問(wèn)題，那不太可能是營(yíng)養體系問(wèn)題?？赡苁莾龃姝h(huán)節出現問(wèn)題，傳代后不會(huì )有好轉，看看細胞能增殖出來(lái)不，增殖不出來(lái)就需要重新復蘇了。

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▲問(wèn)：請問(wèn)上面三個(gè)圖里，細胞是染菌了嗎？昨天給單獨加了100ul過(guò)濾的bi血清。

答：從照片上看黑點(diǎn)的形態(tài)高倍數放大是球菌，低倍數放大它們是立體聚集在一起，疑似是葡萄球菌。平面聚集的是鏈球菌。

問(wèn)：黑點(diǎn)是不會(huì )動(dòng)的，用三抗可以嗎，還有救嗎？

答：細胞還有庫存的話(huà)建議重新復蘇，因為細胞感染了，去除要花多些時(shí)間。

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