对付老公出轨最狠的一招_CAT活性的相-抽提分析法-深圳市安培生物科技有限公司

技術(shù)文章ARTICLE

您當前的位置：首頁(yè) > 技術(shù)文章 > CAT活性的相-抽提分析法

CAT活性的相-抽提分析法

發(fā)布時(shí)間： 2021-12-16　　點(diǎn)擊次數： 920次

材料與儀器
轉染細胞
氯霉素 Tris·Cl TMPD 二甲苯
離心機離心管培養箱
步驟
一、來(lái)源于哺乳動(dòng)物細胞

1. 按“CAT活性的層析分析法"中的步驟1~5的凍融法，制備哺乳動(dòng)物細胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制細胞方法來(lái)收集細胞，則將原位裂解法的步驟1至4用以下的步驟2至4代替。

2. 室溫下，300 g 離心5 min，棄去上清。每107細胞加入1 ml 低滲緩沖液，離心，棄上清。然后每107細胞加Triton裂解液200 μl。

二、來(lái)源于植物原生質(zhì)體

1. 室溫下，2 000~4 000 g 離心5 min，將植物原生質(zhì)體細胞收集于1.5 ml 的微量離心管中，棄去上清。

2. 往細胞沉淀加50 μl 低滲緩沖液，在旋渦混合器上劇烈振蕩，將離心管置于-70℃ 15 min以上，或置于干冰/乙醇浴中5 min 以?xún)鼋Y樣品。融解樣品，在室溫下13 000 g 離心2 min，將上清移入一個(gè)干凈管中。

3. 對于分析50 μl 細胞提取液，配置如下CAT分析混合液
20 μl 0.01 μCi/μl ［3H］氯霉素
5 μl 5 mg/ml 丁酰輔(酶)A
5 μl 2 mol/l Tris·Cl，pH8.0
20 μl H2O

4. 對每組分析，將50 μl CAT分析混合液加入50 μl 細胞提取液中。37℃溫育30~90 min。

5. 用200 μl 2：1的TMPD/二甲苯劇烈報蕩提取乙?；穆让顾?，離心并移出上層液相至一只閃爍瓶中。

6. 樣品中加3~5 ml 閃爍液，計數測定CAT的活性。

同實(shí)驗其他方法
CAT活性的層析分析法
1. 100 mm 培養皿中的轉染了CAT表達質(zhì)粒的貼壁細胞，用PBS洗兩次，每次5 ml每培養皿加入1 ml TEN溶液。將細胞置于冰浴5 min。 2. 用橡膠
原位裂解細胞的CAT分析法
1. 60 mm 培養皿中轉染了CAT表達質(zhì)粒的細胞，用2 ml PBS洗1次。每培養皿加入2 ml 低滲緩沖液，在室溫下溫育2~5 min。 2. 吸去低滲緩沖液，加入400 μl T
人生長(cháng)激素的放射免疫分析法
1. 取轉染了hGH表達質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物細胞的培養液100~500 μl。 2. 加100 μl 培養液或標準品至12 mm×75 mm 圓底試管中。加入100 μl 125I-
以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉染、大規模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶(hù)，提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑；inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細胞培養規模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。

下一篇：人生長(cháng)激素的放射免疫分析法

上一篇：含甲酰胺的測序膠

產(chǎn)品中心 Products

CAT活性的相-抽提分析法

材料與儀器

步驟

同實(shí)驗其他方法