細胞培養常遇問(wèn)題集錦（六）

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▲問(wèn)：有時(shí)候細胞和細胞之間就會(huì )出現這種小黑點(diǎn)，高倍鏡下看少數在原地打轉，但是培養液不渾濁。那其中不會(huì )動(dòng)的是細菌嗎？

答：原地打轉的可能為黑膠蟲(chóng)，會(huì )動(dòng)的是細菌，細菌有鞭毛。黑膠蟲(chóng)是一種現象，身份可能是細菌，有鞭毛會(huì )游動(dòng)。

27、

問(wèn)：想問(wèn)一下，已經(jīng)使用三抗以及抗支原體的藥物培養細胞一周，但還是有少量黑膠蟲(chóng)，但細胞生長(cháng)狀態(tài)還好，這樣的話(huà)接下來(lái)還需要處理嘛？好像有一種有少量黑膠蟲(chóng)但不影響細胞狀態(tài)可以不做處理的說(shuō)法？

答：一周，黑膠蟲(chóng)數量減少，已經(jīng)見(jiàn)效了，但還是要繼續處理，因為黑膠蟲(chóng)和細胞有此消彼長(cháng)的特點(diǎn)，細胞復蘇或剛傳代時(shí)，因為此時(shí)細胞狀態(tài)差，所以特別容易爆發(fā)黑膠蟲(chóng)，黑膠蟲(chóng)數量增多，當細胞復蘇率增強時(shí)，黑膠蟲(chóng)數量會(huì )減少。

28、

問(wèn)：話(huà)說(shuō)養細胞的時(shí)候，一直加雙抗，會(huì )對哪些實(shí)驗有影響呢？之前聽(tīng)說(shuō)做干擾的時(shí)候，要撤雙抗。

答：一般做功能學(xué)實(shí)驗，藥理學(xué)，毒理學(xué)，信號通路都要撤掉雙抗。

29、

問(wèn)：Cho傳代接種密度0.4 e5，4天才長(cháng)到11e5，是怎么回事？DT從16.5變成20了。一直都用的一樣的培養基，是不是凍溶會(huì )影響？是cho細胞，搖瓶培養。

答：檢查一下?tīng)I養體系是不是不適合，如不是，那就考慮是胰酶消化這一步是不是有問(wèn)題。你這邊是把cho貼壁馴化成懸浮了。

30、

問(wèn)：請問(wèn)怎么培養破骨細胞？怎么提取到培養的protocol？遇到一個(gè)情況，怎么消化也消化不下來(lái)，想從源頭找一找，是什么原因？

答：破骨細胞的培養方法主要有：骨髓機械分離法，骨髓細胞誘導法，脾干細胞誘導法，血液?jiǎn)魏思毎T導法，小鼠RAW264.7細胞系誘導法及骨巨細胞瘤分離法。

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