懸浮細胞傳代怎么傳代，看這里！

小伙伴們都知道，實(shí)驗室里培養的動(dòng)物細胞一般可以簡(jiǎn)單地分為兩大類(lèi)，貼壁細胞和懸浮細胞。貼壁細胞（adherent cells）指的是這類(lèi)生長(cháng)必須有可以貼附的支持物表面,只有依靠自身分泌的或培養基中提供的貼附因子才能在該表面上生長(cháng)，繁殖的細胞。當細胞在該表面生長(cháng)后，一般會(huì )形成兩種形態(tài)，即成纖維樣細胞或者上皮樣細胞。而另一類(lèi)則是細胞生長(cháng)不依賴(lài)支持物表面，在培養液中呈懸浮狀態(tài)生長(cháng)，這類(lèi)細胞我們稱(chēng)之為懸浮細胞。懸浮細胞在顯微鏡下觀(guān)察，一般是單個(gè)生長(cháng)的大小均一的圓圓的，亮亮的形態(tài)規則的細胞形態(tài)，也有部分細胞聚集，成團生長(cháng)。

實(shí)際上貼壁生長(cháng)的細胞跟懸浮的細胞都有很多種?；铙w體內的細胞當離體置于體外培養時(shí)大多數均以貼壁方式生長(cháng)，主要包括一些正常細胞和腫瘤細胞，比如成纖維細胞，骨骼組織（骨及軟骨），心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質(zhì)細胞，內分泌細胞，黑色素細胞以及各種腫瘤細胞等。

而少數細胞在體外培養時(shí)則是懸浮生長(cháng)，包括一些取自血、脾或骨髓的培養細胞，尤其是血液白細胞以及淋巴細胞等。今天我們就來(lái)討論討論懸浮細胞的培養吧。

從懸浮細胞的定義上來(lái)說(shuō)，懸浮細胞是不貼壁的，懸浮生長(cháng)的細胞，所以由此可知懸浮細胞不需要酶的作用就可以使其從培養容器表面脫離，故懸浮細胞傳代培養的方法較為簡(jiǎn)單。一般實(shí)驗室中常用直接傳代法和離心傳代法（在發(fā)現有細胞碎片的情況下）來(lái)處理懸浮細胞。當小伙伴們觀(guān)察到懸浮細胞已經(jīng)長(cháng)滿(mǎn)至 80%～90%（細胞懸液變黃）的時(shí)候，細胞就可以進(jìn)行傳代操作了。

從顯微鏡下觀(guān)察，如果細胞狀態(tài)良好（基本無(wú)細胞碎片，細胞形態(tài)規則）時(shí)，則可以選擇直接傳代法。將原瓶中的培養基按比例（具體比例視實(shí)驗而定，但是不能太稀，太稀細胞長(cháng)不起來(lái)）分裝到新的培養瓶中，然后補加新鮮培養基（補加的培養基量不能太打，否則會(huì )導致細胞因為密度過(guò)低而養不起來(lái)），然后隔天觀(guān)察細胞密度來(lái)考慮是否需要補液。

但是當從顯微鏡下觀(guān)察，細胞狀態(tài)較差時(shí)（細胞碎片較多，細胞形態(tài)不規則）時(shí)，則需要使用離心傳代法。首先，要將細胞懸液轉移到離心管內，1000rpm 離心 5 min；然后棄去上層清液，輕輕地將細胞沉淀彈散（盡量不用吹打，會(huì )導致細胞狀態(tài)不好甚至死亡），使用新鮮的培養基重懸細胞；最后用吸管吸取適量細胞懸液，裝入新的培養瓶，再加入適量的新鮮培養基，繼續培養。

好啦，懸浮細胞的傳代培養就介紹到這里了，小伙伴們下期再見(jiàn)。