細胞培養之“黑膠蟲(chóng)”的防治

“黑膠蟲(chóng)"/“Nanobacteria"究竟是何方神圣？《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》雜志（PIBB）2020年第1期發(fā)表了題為細胞培養中“黑膠蟲(chóng)"污染的檢測及防治一文。根據作者描述，“黑膠蟲(chóng)"污染具有以下特征：

1. 培養基和正常培養基沒(méi)有區別；

2. 低倍鏡下它是黑色的點(diǎn)點(diǎn)和細胞碎片沒(méi)有區別

3. 高倍鏡下它會(huì )做運動(dòng)給你看，也能模仿細胞碎片和細胞分泌物的布朗運動(dòng)。還有黑膠蟲(chóng)“路癡"到處跑的。

4. 與細胞的數量成反比，細胞越多，它越少，細胞越少它越多

5. 細胞狀態(tài)越養越差。

該科研成果除了得出這些結論外，還成功的鑒定出“黑膠蟲(chóng)"為缺陷短波單胞菌屬新菌株，連名字都有了叫：Brevundimonas sp. GYBL3。

當然也有實(shí)驗結果表示：初感染黑膠蟲(chóng)對細胞和實(shí)驗都沒(méi)有影響，但是后續細胞生長(cháng)越來(lái)越慢，甚至停滯不長(cháng)，黑點(diǎn)越來(lái)越多，直到細胞“全軍覆沒(méi)"。

黑膠蟲(chóng)的防治：

1、盡量使用好的血清，但是好的血清一般價(jià)格高的離譜，經(jīng)濟條件不允許，也可以選用進(jìn)口新生牛血清代替。建議如果使用的是好的血清可不必滅活，這樣可以減少“小黑點(diǎn)"的形成。

2、如果是貼壁細胞的話(huà)，可用無(wú)菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。若是懸浮的話(huà)，就不太好處理啦，可以向其中少加一點(diǎn)滋養細胞。加滋養細胞對有黑膠蟲(chóng)的剛復蘇的細胞很有效！要是復蘇很久的細胞，那就用PBS反復離心幾次 ，一般建議是800-1000轉3分鐘， 離心2到3次，重新種植，加四環(huán)素等抗黑膠蟲(chóng)的藥物進(jìn)行抑制，讓細胞盡快長(cháng)起來(lái)，黑膠蟲(chóng)就消失了。

3、換用信得過(guò)的塑料培養瓶。

4、停止復蘇，停止養細胞，*消毒所有用于細胞培養的一切用品，包括所用的培養瓶，培養基，吸管，胰酶，孵箱，超凈臺、空間等等你能想到的和細胞培養相關(guān)的所有物品，當然也別忘了您的白大褂。

5、如果有其它可用的細胞，那么污染的細胞最好扔掉；如沒(méi)有，可試著(zhù)用氯霉素 ，紅霉素，或四環(huán)素進(jìn)行抑制，或選用黑膠蟲(chóng)抑制劑。

6、minocycline具有抑制的作用，可以在換液的時(shí)候使用。由于黑膠蟲(chóng)尚未明確鑒定出是什么生物，所以上述的處理方法不一定正確，可以供考慮采用。