小鼠睪丸間充質(zhì)細胞轉染試劑

一、小鼠睪丸間充質(zhì)細胞轉染試劑簡(jiǎn)介：

隨著(zhù)分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中，其應用越來(lái)越廣泛。

理想細胞轉染方法，應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。而Zeta Life多肽小分子轉染試劑采用新型分子材料，其尺寸大小是傳統脂質(zhì)體轉染試劑體積的1/10;通過(guò)細胞主動(dòng)吞噬吸收進(jìn)入細胞；進(jìn)入后對細胞膜無(wú)物理性損傷，不易出現細胞變形，保持高的細胞活力；不激活細胞表面或細胞體內marker;可反映真實(shí)的細胞通路蛋白原始數據；可轉染免疫細胞、懸浮細胞等。

二、使用說(shuō)明：

1、材料準備

RNA 濃度 20 uM /L

質(zhì)粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于無(wú)菌雙蒸水或超純水；②無(wú)內毒素 ）

2、操作步驟

提前 1 天接種細胞：細胞匯合度在 60-80%左右，再進(jìn)行轉染。

核酸復合物制備：將核酸與轉染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細胞培養基中加入核酸復合物：根據參考用量在細胞中加入核酸復合物，并輕輕混勻；細胞培養基 里面可以含有血清。

細胞換液：轉染 24 小時(shí)后對細胞進(jìn)行正常換液，懸浮細胞轉染過(guò)程中不用換液。

分析結果：質(zhì)粒 DNA 轉染 48-72 小時(shí)后熒光檢測轉染效率，48-96 小時(shí)檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進(jìn)行穩定表達細胞株的篩選，則在轉染后 24-48 小時(shí)左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA 轉染后 9 小時(shí)熒光檢測轉染效率，48-72 小時(shí)檢測 mRNA 或蛋白表達。

三、產(chǎn)品說(shuō)明：

1、產(chǎn)品名稱(chēng)

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規格

貨號：AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

規格：0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、儲存條件

常溫運輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復凍融。

四、小鼠睪丸間充質(zhì)細胞轉染試劑轉染效果