ZETA LIFE高效率轉染試劑5ml

ZETA LIFE高效率轉染試劑5ml

一、產(chǎn)品說(shuō)明：

1、產(chǎn)品名稱(chēng)

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規格

貨號：AD600500

規格：5ml

3、儲存條件

常溫運輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復凍融。

二、使用說(shuō)明：

1、材料準備

RNA 濃度 20 uM /L

質(zhì)粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于無(wú)菌雙蒸水或超純水；②無(wú)內毒素 ）

2、操作步驟

提前 1 天接種細胞：細胞匯合度在 60-80%左右，再進(jìn)行轉染。

核酸復合物制備：將核酸與轉染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細胞培養基中加入核酸復合物：根據參考用量在細胞中加入核酸復合物，并輕輕混勻；細胞培養基 里面可以含有血清。

細胞換液：轉染 24 小時(shí)后對細胞進(jìn)行正常換液，懸浮細胞轉染過(guò)程中不用換液。

分析結果：質(zhì)粒 DNA 轉染 48-72 小時(shí)后熒光檢測轉染效率，48-96 小時(shí)檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進(jìn)行穩定表達細胞株的篩選，則在轉染后 24-48 小時(shí)左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA 轉染后 9 小時(shí)熒光檢測轉染效率，48-72 小時(shí)檢測 mRNA 或蛋白表達。

三、注意事項：

1、質(zhì)粒 DNA 必須溶解于無(wú)菌雙蒸水或超純水，但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的質(zhì)粒轉染效率會(huì )下降 80%左右，甚至會(huì )轉染失敗。

2、質(zhì)粒必須去除內毒素，內毒素對細胞將產(chǎn)生很大的細胞毒性，會(huì )導致轉染效率下降 70%-80%左 右，甚至導致轉染失?。ㄍ扑]使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去內毒素質(zhì)粒提取試劑盒）。

3、復合物的制備過(guò)程中是絕對不能用其他任何試劑對核酸或轉染試劑進(jìn)行稀釋?zhuān)恍鑼⒑怂岷娃D染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合，如果進(jìn)行了稀釋會(huì )導致轉染失。

4、轉染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次，室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細胞培養板。

5、轉染 24 小時(shí)后進(jìn)行正常換液，不能像 Lipo2000 一樣轉染 4-6 小時(shí)后換液。

6、原代細胞、免疫細胞轉染時(shí)，細胞基礎培養基里面不能含有雙抗培養基。

轉染操作示意圖

不同轉染實(shí)驗各成分推薦用量

四、優(yōu)秀表現

Zeta Life多肽小分子轉染試劑的尺寸大小是傳統脂質(zhì)體轉染試劑體積的1/10;

本轉染試劑是通過(guò)細胞內?和細胞主動(dòng)吸收進(jìn)入細胞；

本轉染試劑進(jìn)入后對細胞膜無(wú)物理性損傷，不易出現細胞變形，保持高的細胞活力；

不激活細胞表面或細胞體內marker;

可反映真實(shí)的細胞通路蛋白原始數據；

可轉染免疫細胞、懸浮細胞等。

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Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑系列：                    

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600025  （Zeta Life原代細胞轉染試劑）0.25ml/詢(xún)價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600050  （Zeta Life真核細胞轉染試劑）0.5ml/詢(xún)價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600075  （Zeta Life可代謝轉染試劑）0.75ml/詢(xún)價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600150  （Zeta Life免疫細胞轉染試劑）1.5ml/詢(xún)價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600500  （Zeta Life懸浮細胞轉染試劑）5ml/詢(xún)價(jià)

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD601000  （Zeta LifeRAW264.7細胞轉染試劑）10ml/詢(xún)價(jià)

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