免疫組化實(shí)驗詳細步驟匯總

步驟：

1.切片準備：將組織進(jìn)行石蠟包埋，切成薄片并貼附于載玻片上。-用到的產(chǎn)品：載玻片等。

2.烤片：將切片放入烤箱中適當溫度烤片，使切片緊密貼附。

3.脫蠟：依次使用二甲苯等進(jìn)行脫蠟處理。

- 用到的產(chǎn)品：二甲苯、乙醇等。

4.水化：梯度乙醇水化至水。

5.抗原修復：根據需要選擇合適的抗原修復方法，如熱修復或酶修復等。

- 用到的產(chǎn)品：抗原修復液等。

6. 滅活內源性過(guò)氧化物酶：使用過(guò)氧化氫溶液處理。

- 用到的產(chǎn)品：3%過(guò)氧化氫溶液。

7. 封閉：用血清或 BSA 等封閉非特異性結合位點(diǎn)。

- 用到的產(chǎn)品：封閉液。

8. 一抗孵育：滴加特異性一抗，濕盒中孵育。

- 用到的產(chǎn)品：一抗。
9. 洗片：用 PBS 多次沖洗。
10. 二抗孵育：加入相應二抗孵育。
- 用到的產(chǎn)品：二抗。
11. 洗片：再次 PBS 洗。
12. 顯色：使用合適的顯色劑顯色，如 DAB 等。
- 用到的產(chǎn)品：DAB 顯色試劑盒等。
13. 復染：如用蘇木精復染細胞核。
- 用到的產(chǎn)品：蘇木精染液等。
14. 脫水透明：梯度乙醇脫水，二甲苯透明。
15. 封片：中性樹(shù)膠封片。

需要注意的是，具體步驟和產(chǎn)品可能因實(shí)驗條件和抗體要求等有所不同，在實(shí)際操作中需根據實(shí)際情況進(jìn)行調整和優(yōu)化。

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