共表達抗原的工作

抗原間的相互關(guān)系分為三種，分別是互斥關(guān)系、子代與親代的關(guān)系和共表達關(guān)系。

互斥關(guān)系是指兩種抗原不會(huì )同時(shí)表達在一中細胞上，即表達A不表達B，表達B不表達A。配色時(shí)，互斥的抗原是允許熒光溢漏的。

子代與親代關(guān)系是指抗原之間是上下級關(guān)系，即下級抗原是在上級抗原的基礎上進(jìn)行分析的。

共表達關(guān)系是指兩種抗原同時(shí)表達在一種細胞上。配色時(shí)，共表達抗原要搭配熒光干擾較小的熒光素，盡量避免熒光溢漏。

什么樣的抗原屬于共表達抗原呢？以Treg細胞為例，Treg細胞同時(shí)表達CD25和Foxp3，那么CD25和Foxp3就屬于共表達關(guān)系。在這種情況下，CD25和Foxp3需要搭配相互之間沒(méi)有溢漏的熒光素，比如搭配APC和PE，因為這兩個(gè)熒光素是幾乎沒(méi)有干擾的，因此可獲得預期的數據結果。

在多色流式實(shí)驗中，如果兩個(gè)共表達Marker使用的熒光染料之間干擾較嚴重，則會(huì )對圈門(mén)造成干擾，影響實(shí)驗結果的準確性。雖然我們也能通過(guò)調節補償來(lái)減少光譜重疊的影響，但對被干擾通道熒光靈敏度降低的影響是無(wú)法通過(guò)后續的結果分析來(lái)消除的。

如果共表達抗原之間有嚴重熒光干擾會(huì )怎么樣呢？那結果就可能出現如上圖右所示的情況，雖然進(jìn)行了補償調節，但得到的目的細胞的比例跟實(shí)際有差別。