細胞培養中究竟要不要加抗生素？

簡(jiǎn)介： 

  提到細胞污染，大家想到較多的是細胞中的細菌、渾濁的培養基、培養瓶中的非法入侵者等。此外，病毒和化學(xué)污染對細胞培養物的健康也非常重要，確保細胞株不存在交叉污染也是獲得可重復結果的關(guān)鍵因素。

控制污染的關(guān)鍵是如何檢測出污染。

  細菌、真菌和酵母污染物通常是肉眼可見(jiàn)的，或許能迅速殺死細胞，但微妙的形態(tài)可能使重要的微生物入侵者像支原體一樣難以被檢測到。相比之下，傳統光學(xué)顯微鏡無(wú)法檢測到病毒，因此病毒污染通常是在觀(guān)察到無(wú)法解釋的分離、細胞健康較差的其他跡象或甚至是細胞死亡時(shí)才被發(fā)現的。

總結：

抗生素雖然減少了可以觀(guān)察到的細菌、酵母等微生物的污染機會(huì )，卻會(huì )增加支原體、病毒等隱性污染的機會(huì )。

因為細胞培養中污染主要來(lái)源于空氣中的微粒和汽霧，而這些微粒和汽霧可以同時(shí)攜帶支原體、病毒和其他微生物。當抗生素使用時(shí)，可見(jiàn)污染被抑制而隱性污染又沒(méi)被注意到，這樣支原體、病毒等隱性污染的機會(huì )反而增加了。Barile的一項研究顯示72%持續使用抗生素培養的細胞有支原體污染，而不使用抗生素培養的細胞支原體污染的比例只有7%

反過(guò)來(lái)如果不使用抗生素，支原體、病毒的污染往往會(huì )伴隨細菌和酵母等的污染。由于細菌和酵母等的污染很容易觀(guān)察到，污染細胞的及時(shí)清理就大大減少了支原體、病毒的污染機會(huì )。

潛在的支原體、病毒的污染會(huì )帶來(lái)很大的危害。這些微生物的存在會(huì )影響細胞的理化性質(zhì)，從而使研究者得到錯誤的實(shí)驗結果。在嚴重的情況下，甚至使一個(gè)實(shí)驗室數年的研究白白浪費。

由于過(guò)濾技術(shù)的提高和超凈臺質(zhì)量的改進(jìn)，在規范的細胞培養操作過(guò)程中引進(jìn)污染的機會(huì )已經(jīng)被大大降低了。所以比較合理的建議是，在常規的細胞培養中不要使用抗生素。只有在培養污染源很多（比如組織培養），或者培養非常珍貴的細胞株時(shí)才使用抗生素。

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