細胞培養時(shí)的三個(gè)常見(jiàn)小問(wèn)題

三個(gè)常見(jiàn)小問(wèn)題：

細胞培養用的培養基是不是必須加雙抗？血清在使用之前是不是一定要滅活？往培養基里加細胞因子又是什么操作？

要不要加雙抗？

在培養基中添加抗生素是一種常見(jiàn)的操作，其主要作用是抑制或殺死培養物中的某些細菌或真菌，從而避免它們對目標細胞的干擾和污染。

在培養實(shí)驗中，選擇適當濃度和種類(lèi)的抗生素，可以有效地消除或減少雜菌、污染菌或其他不需要的微生物，保證培養物的純度和穩定性。

同時(shí)，添加抗生素還可以用來(lái)篩選或檢測耐藥性菌株，評估其對抗生素的敏感性和耐受性。

但是，添加抗生素并不能確保你的細胞一定不被微生物污染，因操作不當造成污染的還是會(huì )被污染的。

并且，一旦細胞被污染，抗生素也只能起到一定的抑制延緩作用，并不能全部殺滅微生物。而且，長(cháng)期添加抗生素的話(huà)，還容易掩蓋培養環(huán)境的真實(shí)情況。

因此 ，雖然在培養基中添加抗生素是常見(jiàn)操作，但并不是必須操作。

細胞因子是什么？

除了抗生素外，培養基中還可以添加細胞因子，以模擬體內環(huán)境和調節細胞功能。

細胞因子是一類(lèi)多肽分子或蛋白質(zhì)，由細胞自身或其他細胞產(chǎn)生，并通過(guò)受體介導的信號轉導途徑影響目標細胞的增殖、分化、存活、遷移等過(guò)程。

在細胞培養中，添加適當濃度和種類(lèi)的細胞因子，可以促進(jìn)細胞增殖和分化，提高細胞存活率和功能表現。

例如，添加表皮生長(cháng)因子（EGF）可以促進(jìn)表皮細胞增殖和修復；添加肝細胞生長(cháng)因子（HGF）可以促進(jìn)肝細胞增殖和再生；添加白細胞介素-2（IL-2）可以促進(jìn)T淋巴細胞增殖和活化等。

此外，添加某些細胞因子還可以誘導干細胞分化為特定類(lèi)型的成體細胞，如添加神經(jīng)營(yíng)養因子（NGF）可以誘導干細胞分化為神經(jīng)元。

血清要滅活才能用？

血清中含有生長(cháng)因子可促進(jìn)細胞繁殖，含有附著(zhù)因子可促進(jìn)細胞貼壁，同時(shí)還有一種特殊的活性能抵抗胰蛋白酶的消化作用。

血清內含有豐富的礦物質(zhì)、酯類(lèi)和激素。最常見(jiàn)的血清包括：小牛血清、胎牛血清、成年馬血清等。其中胎牛血清對培養要求高的細胞系。

血清來(lái)源于動(dòng)物， 因此必定存在批次間的差異，且生產(chǎn)過(guò)程中由于工藝流程的不同，哪怕是同一類(lèi)型的血清也會(huì )存在質(zhì)量上的巨大差異。

血清的滅活是將血清置于56攝氏度中30分鐘，然后再分裝成數份保存于-20攝氏度。

血清加熱的最初目的是為了免疫分析時(shí)用于滅活補體的，因此就有了血清使用前要滅活的說(shuō)法。

但現在商業(yè)化的血清產(chǎn)品，基本上出廠(chǎng)之前都經(jīng)過(guò)了滅活處理，所以一般情況下，就不需要再操作一次滅活了，除非供應商在銷(xiāo)售時(shí)特別強調了要進(jìn)行這個(gè)操作。

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