siRNA轉染操作及要點(diǎn)

轉染試劑儲存

轉染試劑-20°C避光保存，Trans Enhancer于2-8°C存放

體外轉染操作流程

1：細胞接種:轉染前一天接種細胞，使細胞在轉染時(shí)密度在30-50%

2：siRNA-Starvio 轉染復合物準備:Starvio 用25ulTrans Enhancer 稀釋室溫孵育5min將siRNA稀釋液與 Starvio 稀釋液混合(總體積50ul)

將轉染復合物加到培養的細胞內 

注意事項

1:建議對轉染條件進(jìn)行優(yōu)化，特別是第一次使用。例如:24孔培養板，siRNA 用量在 6、12、18、24、30 pmol之間調整；

2：Starvio 試劑用量在1.0-3.0ul之間調整；

3：轉染過(guò)程盡量不要使用抗生素，否則會(huì )導致細胞死亡；

4：增加計算接種細胞的數量，使轉染時(shí)細胞密度在30-50%左右。

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