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                                細胞運動(dòng)觀(guān)察

                                發(fā)布時(shí)間: 2023-01-12  點(diǎn)擊次數: 937次

                                簡(jiǎn)介

                                纖毛與鞭毛是單細胞或多細胞生物細胞表面伸出的特化結構,其內部是由微管組成的軸(軸中央由 2 條微管組成,外圍由 9 組二聯(lián)微管環(huán)繞),軸的基部與基體相連,周?chē)患毎に@。直徑為 0.15~0.3 μm,屬于細胞的運動(dòng)器官。其運動(dòng)一般認為是由二聯(lián)微管間的滑動(dòng)所引起,鞭毛運動(dòng)方式為波浪式、纖毛運動(dòng)為波動(dòng)式。

                                原理

                                細胞運動(dòng)觀(guān)察實(shí)驗的基本原理是纖毛與鞭毛是單細胞或多細胞生物細胞表面伸出的特化結構,其內部是由微管組成的軸(軸中央由 2 條微管組成,外圍由 9 組二聯(lián)微管環(huán)繞),軸的基部與基體相連,周?chē)患毎に@。直徑為 0.15~0.3 μm,屬于細胞的運動(dòng)器官。其運動(dòng)一般認為是由二聯(lián)微管間的滑動(dòng)所引起,鞭毛運動(dòng)方式為波浪式、纖毛運動(dòng)為波動(dòng)式。
                                暗視野照明法是一種使照射被檢物體的光線(xiàn)不直接進(jìn)入物鏡的照明方法。常用它觀(guān)察未染色的活體細胞或膠體粒子。利用此法,在顯微鏡下觀(guān)察時(shí)直接看不到通過(guò)標本的照明光線(xiàn),而是被檢物反射或衍射的光線(xiàn)進(jìn)入物鏡,可提高分辨率,在暗視野中可以看到明亮的被檢物體的存在和運動(dòng),但它們的內部結構卻看不清楚。

                                材料與儀器

                                器材:
                                探針、蛙板、大頭針、蠟屑、載玻片、蓋玻片、解剖剪、鑷子、牙簽、吸管、平皿、普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、蟾蜍。
                                試劑:

                                ①蟾蜍生理鹽水。

                                步驟

                                基本過(guò)程可分為如下幾步:

                                (一)觀(guān)察蟾蜍上頜黏膜上皮細胞的纖毛運動(dòng)

                                A 穿刺法處死蟾蜍 取蟾蜍 1 只,左手食指和中指夾住蟾蜍前肢,無(wú)名指和小指夾住后肢,大拇指壓住頭部,使頭和軀干呈一定角度??资殖纸馄梳?,對準頭和軀干背側相連的凹陷處(即枕骨大孔),以穿刺法搗毀腦和脊髓。當蟾蜍四肢無(wú)力下垂時(shí),即表明動(dòng)物已死。
                                B 將蟾蜍腹部向上、固定在蛙板上。
                                C 沿蟾蜍兩側口角向后剪開(kāi)約 1 cm,將下頜后翻固定在腹部。
                                D 在上頜中線(xiàn)距喉頭 1 cm 處放置蠟屑,觀(guān)察蠟屑向什么方向移動(dòng)?記錄蠟屑開(kāi)始移動(dòng)到消失的時(shí)間。
                                E 用眼科剪剪取喉頭前部上頜黏膜組織約 4 mm x 4 mm 小塊,用牙簽挑取剪下的黏膜,將縱切面貼到載片上。
                                F 加 1 滴生理鹽水置載玻片的標本上,加蓋玻片,光鏡下觀(guān)察。

                                (二)暗視野觀(guān)察蟾蜍精子的鞭毛運動(dòng)

                                A 將前面實(shí)驗所用蟾蜍沿腹中線(xiàn)剪開(kāi),暴露出黃色圓柱狀精巢。
                                B 剪取一側精巢放置盛有自來(lái)水的平皿中,用鑷子夾住精巢的一端,清洗血污。
                                C 取洗凈的精巢放到另一干凈的平皿上,用眼科剪將精巢充分剪碎后,加入數滴自來(lái)水,混勻。
                                D 用吸管吸取平皿內液體,滴 1 滴于載玻片上,蓋上蓋玻片,稍待 2~3 min,鏡下觀(guān)察。

                                注意事項

                                1 蟾蜍上頜黏膜上皮細胞的纖毛運動(dòng) 低倍鏡下觀(guān)察纖毛運動(dòng)的現象,然后換高倍鏡仔細觀(guān)察纖毛有規律的運動(dòng)。
                                2 暗視野觀(guān)察蟾蜍精子的鞭毛運動(dòng) 低倍鏡下可看到視野中有許多精子,頭部呈長(cháng)錐形,尾為細長(cháng)的線(xiàn)狀結構;高倍鏡下,見(jiàn)有許多靠尾部鞭毛彎曲擺動(dòng)驅使運動(dòng)的精子。


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