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如何提高腫瘤細胞培養存活率和生長(cháng)率？

發(fā)布時(shí)間： 2022-10-20　　點(diǎn)擊次數： 761次

原理
根據人們的經(jīng)驗，腫瘤細胞在體外不易培養，建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。

當腫瘤組織或細胞初代接種培養后，常出現以下幾種情況：

1. *無(wú)細胞游出或移動(dòng)；

2. 有細胞移動(dòng)和游出，但無(wú)細胞增殖，細胞長(cháng)時(shí)間處于停滯狀態(tài)以致難以傳代；

3. 有細胞增殖，傳若干代后停止生長(cháng)或衰退死亡；

4. 傳數代后細胞增殖緩慢，經(jīng)過(guò)一段停滯期后，才又呈旺盛生長(cháng)狀態(tài)，形成穩定生長(cháng)的腫瘤傳代細胞系。

以上現象說(shuō)明腫瘤細胞對體外生存條件有較高的要求，并需經(jīng)過(guò)對新環(huán)境的適應才能生長(cháng)，因此欲獲得好的培養效果，不能局限于一般培養法，必須采用一些特殊的措施。

材料與儀器
瘤組織
Hanks
棉球
步驟
一、適宜底物

如：把經(jīng)過(guò)純化的細胞接種在不同的底物上，如鼠尾膠原底層、飼細胞層等。

二、生長(cháng)因子

應用促細胞生長(cháng)因子，向培養液中增加一種或幾種促細胞生長(cháng)因子。根據細胞種類(lèi)不同選用不同的促生長(cháng)物，常用有胰島素、氫化可的松、雌激素以及其它生長(cháng)因子。

三、動(dòng)物體媒介培養

為提高腫瘤細胞對體外培養環(huán)境的適應力和增加有活力癌細胞（干細胞）的數量，可采用動(dòng)物體轉嫁接種成瘤后，再從動(dòng)物體內取出進(jìn)行培養，能提高體外培養的成功率。受體動(dòng)物以裸鼠最好。

1. 瘤塊接種

取新鮮瘤組織，用Hanks液洗凈血污，切成1~3 毫米小塊，用穿刺針頭吸一小瘤塊，用酒精棉球擦拭動(dòng)物腋部后，直接刺入皮下，注入瘤塊。

2. 飼養觀(guān)察，待腫瘤生長(cháng)達較大體積后，剝取出瘤組織。

3. 進(jìn)行體外培養。

4. 為防止失敗，仍取部分瘤組織繼續在裸鼠體內傳代。通過(guò)裸鼠媒介接種，有活力的腫瘤細胞數量增多，細胞培養易于成功。

腫瘤細胞培養方法與培養正常細胞*相同，但成功率比正常細胞高。

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