BV2細胞異常生長(cháng)形態(tài)解析及解決方案

從表型上看，BV2細胞對MAC1和MAC2抗原呈陽(yáng)性，而對MAC3、膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）和半乳糖核苷（GC）抗原呈陰性[1]。

圖A. BV2細胞顯微照片，bar=30 μm.

圖B. 通過(guò)掃描電鏡觀(guān)察，在玻璃蓋板上培養的BV2細胞，bar=5 μm.

圖C. 通過(guò)透射電鏡觀(guān)察，BV2細胞的部分細胞質(zhì)吞噬iCA，bar=3 μm.

（圖片引用自文獻^[1]）

在培養BV2細胞的時(shí)候，同學(xué)們最常遇到的問(wèn)題就是生長(cháng)形態(tài)異常。生長(cháng)形態(tài)異常往往伴隨著(zhù)細胞生長(cháng)緩慢、細胞死亡等，導致實(shí)驗做不出結果，給大家帶來(lái)重重困擾。

小普根據多年的實(shí)驗經(jīng)驗，為大家整理了這一現象可能發(fā)生的原因，及相應解決方案。

懸浮細胞為圓形，貼壁細胞既有圓形也有梭形。由于圓形細胞折光率高，它的邊緣看起來(lái)是發(fā)亮的；梭形細胞則向兩端伸出黑色突起。

（圖片源自Procell）

那么，異常生長(cháng)的BV2細胞有哪些形態(tài)呢？

如何根據不同的異常生長(cháng)形態(tài)，調整改善培養條件，及時(shí)解決問(wèn)題？

小普總結如下：

（1）培養基偏堿。培養瓶不透氣或者開(kāi)封時(shí)間過(guò)長(cháng)，培養基PH將增大，可見(jiàn)培養基呈紫紅色。BV2對培養基酸堿度較為敏感，在偏堿培養基中培養數小時(shí)后將會(huì )全部飄起。

（2）復蘇后不貼壁。需要檢查凍存或復蘇操作過(guò)程，以及培養基是否存在問(wèn)題。

實(shí)驗中常用細菌脂多糖（LPS）和干擾素-γ（IFNγ），分別模擬細菌和病毒感染，來(lái)刺激小膠質(zhì)細胞激活。受到刺激的小膠質(zhì)細胞突起縮短變厚，胞體增大，呈現阿米巴樣（如下圖所示）。

但有的時(shí)候BV2形態(tài)變化并不明顯，還需要結合其他實(shí)驗，如檢測NO、IL-13等炎癥因子的表達，來(lái)確定BV2是否被定向激活。

（圖片引用自文獻^[2]）

如果細胞沒(méi)有受到任何刺激，就已經(jīng)呈現阿米巴樣，或者受刺激后，炎癥因子表達沒(méi)有差異，那么細胞有可能發(fā)生了自分化。

其原因可以從以下幾點(diǎn)考慮：

（2）使用的胎牛血清內毒素高，內毒素刺激細胞自分化。

總而言之，BV2細胞的形態(tài)、生長(cháng)狀態(tài)與其生長(cháng)環(huán)境息息相關(guān)，給細胞以最合適的環(huán)境，嚴格按照要求規范操作，細胞也將用好的狀態(tài)回報你。