細胞培養問(wèn)題集錦問(wèn)與答（四）

細胞培養系列第四期，繼續為大家分享細胞培養中遇到的問(wèn)題集錦。

16、

問(wèn)：買(mǎi)的無(wú)血清凍存液說(shuō)明書(shū)上寫(xiě)的直接放入-80度

答：那是直接凍存的，大多數凍存液都是梯度凍存

17、

問(wèn)：初學(xué)細胞培養，養的是hepG2，每次到3天的時(shí)候培養基就會(huì )發(fā)黃，鏡下看到像是死細胞聚集成團的大片東西，請問(wèn)這種情況是染菌了嗎？請問(wèn)如何處理?那種像死細胞聚集成團的感覺(jué)是綠色，請問(wèn)這是染菌嗎？（不是每次這樣，之前都很好，現在三瓶里有一瓶出現這種情況）

答：綠色的感覺(jué)像真菌，也有可能是細胞密度高了，細胞代謝物多。

18、

問(wèn)：有用清除劑處理過(guò)一禮拜，看著(zhù)挺干凈，但是一禮拜培養三代又出來(lái)了，這種是沒(méi)清除干凈還是，可能環(huán)境有污染重復的染到了？

答：這個(gè)污染比較頑固，至少要殺2周，甚至一個(gè)月

19、

問(wèn)：真菌污染一般原因是什么啊

答：真菌里的根霉一般是環(huán)境

20、

問(wèn)：貝克曼細胞計數儀中DT值是啥意思？轉染后DT值會(huì )增加嗎？為什么會(huì )增加呢？

答：是群體倍增時(shí)間，就是細胞數增長(cháng)一倍需要的時(shí)間，一個(gè)常用的評價(jià)細胞生長(cháng)的指標。我們接觸的一般是增加的。大量表達外源蛋白，會(huì )占用細胞生長(cháng)的資源，這個(gè)可能是主要因素。外源基因插入基因組可能也有影響。

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