CCK-8，細胞增殖檢測較為合適的選擇

發(fā)布時(shí)間： 2021-10-08　　點(diǎn)擊次數： 2506次

什么是細胞增殖檢測？

細胞增殖是細胞在周期調控的因子下，通過(guò)DNA復制等反應，完成細胞分裂的過(guò)程。在細胞增殖中，新細胞的產(chǎn)生過(guò)程影響著(zhù)體內所有組織的發(fā)育、生長(cháng)和維持，同時(shí)，它也被嚴格調控著(zhù)，以防失控的細胞分裂（可出現在各種癌癥）導致腫瘤的形成和器官功能的破壞。正因為細胞增殖對生物活動(dòng)的這種廣泛影響，其在各種環(huán)境中的準確評估變得十分重要。

腫瘤細胞增殖和轉化過(guò)程

細胞增殖是通過(guò)細胞分裂引起的細胞數量增加，在整個(gè)生命周期中對正常組織發(fā)育和維持是必須的。一些類(lèi)型的細胞會(huì )處于持續增殖狀態(tài)，如皮膚和骨髓細胞，但許多成人組織中的細胞會(huì )處于非增殖狀態(tài)，只有在損傷或感染時(shí)，才能被激活來(lái)補充細胞。與之相反，細胞周期關(guān)鍵基因突變引起的細胞增殖失調是各類(lèi)癌癥的標志，會(huì )造成腫瘤異常的不受控制的生長(cháng)。

增殖檢測一般用于分析分裂中的細胞數量的變化，進(jìn)而反應細胞的生長(cháng)狀態(tài)及活性，細胞增殖檢測是細胞分析和藥物研發(fā)中經(jīng)常會(huì )使用的手段。目前廣泛應用于腫瘤生物學(xué)，分子生物學(xué)，藥代動(dòng)力學(xué)等領(lǐng)域。

細胞增殖檢測的方法

一類(lèi)是直接法，這種方法就是直接測定進(jìn)行分裂的細胞數來(lái)評價(jià)細胞的增殖能力，另一類(lèi)是間接的方法，我們通過(guò)檢測細胞的活力來(lái)評價(jià)細胞的增殖能力。

常見(jiàn)的細胞增殖檢測方法包含：直接計數法；MTT檢測法；MTS檢測法；CCK-8檢測法；3H-TdR滲入法；Brdu/EdU檢測法；CFSE檢測法；刃天青還原法；活細胞蛋白酶底物法/ATP法等。

常見(jiàn)檢測方法對比

其中，MTT比色是一種目前被廣泛采用的檢測細胞生長(cháng)和存活的方法。

CCK-8試劑盒

CCK-8試劑盒全稱(chēng)Cell Counting Kit-8，是一種基于WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

CCK-8檢測細胞活性原理圖

其工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線(xiàn)粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長(cháng)處測定OD值，間接反映活細胞數量。

CCK-8被經(jīng)常用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗等。

優(yōu)點(diǎn)：

· 酚紅和血清對CCK8法的檢測不會(huì )造成干擾；

· 靈敏度高，可以測定較低細胞密度；

· 細胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時(shí)間反復用酶標儀讀數從而找到最佳測定時(shí)間；

· 檢測時(shí)間短；

· 重復性?xún)?yōu)于MTT法；

· 操作簡(jiǎn)單，省時(shí)省力，省去了洗滌細胞，適合批量樣品檢測；

· 檢測試劑很穩定。

安培生物推薦ZETA LIFE的CCK-8試劑盒

細胞增殖及毒性檢測CCK試劑盒系列貨號規格：

產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱(chēng)	產(chǎn)品規格
K009-100	CCK	100tests
K009-500	CCK	500tests
K009-1000	CCK	1000tests
K009-3000	CCK	3000tests
K010-100	Cell Counting Sensitive Kit	100tests
K010-500	Cell Counting Sensitive Kit	500tests
K010-1000	Cell Counting Sensitive Kit	1000tests
K010-3000	Cell Counting Sensitive Kit	3000tests

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